第一节 鸡寄生虫流行区系的调查研究

一、研究内容

规模化鸡场寄生虫流行区系调查研究和散养鸡寄生虫流行区系调查研究，具体内容包括寄生虫感染种类、感染率、感染强度、地理分布等，在统计感染率和感染强度的基础上确定优势虫种。

感染强度：感染某种寄生虫数量的多少，用最少数量与最多数量区间表示。

平均感染强度：感染某种寄生虫的平均数量。

优势虫种：感染率最高和感染强度最大的寄生虫，有时也可以直接把感染率最高的寄生虫确定为优势虫种。

二、研究方法

(一)调查区域的划分

根据辽宁省的地理、气候及畜禽分布特点将全省划分为辽南(大连、营口、鞍山)、辽北(铁岭)、辽西(锦州、阜新、朝阳、盘锦、葫芦岛)、辽东(丹东、本溪、抚顺)、辽中(沈阳、辽阳)5个区域。

(二)调查样本的确定

1.商品蛋鸡 每个区域内随机抽查3个商品蛋鸡场，每个鸡场随机抽检25只商品蛋鸡，全省共抽检商品蛋鸡375只。

2.商品肉鸡 每个区域内随机抽查3个商品肉鸡场，每个鸡场随机抽检25只商品肉鸡，全省共抽检商品肉鸡375只。

3.散养鸡 每个区域内随机抽查75只散养鸡，全省5个区域内共抽检散养鸡375只。

(三)寄生虫检查方法

对样本现场编号后，跟踪到屠宰场，全部采用家禽全身性寄生虫学完全剖检法进行检查。

家禽全身性寄生虫学完全剖检法操作方法

1.宰杀与剥皮

用舌动脉放血或颈动脉放血的方法宰杀。在死亡或宰杀6～8h内进行检查。首先拔掉羽毛，检查皮肤，发现虫体及时采集。同时对新生肿胀物和结节要刮取下来，压片镜检。然后剥皮，随时采集皮下组织中的虫体。

2.摘出脏器

剥皮后取出胸骨，使内脏完全暴露，并检查气囊内有无虫体，然后分离各脏器，以待检查。分离脏器时，首先分离消化系统，其次分离心脏和呼吸器官，最后摘出肾。器官摘出后，用生理盐水冲洗体腔，反复进行沉淀。最后检查沉淀物。

3.各脏器的检查

(1)食道和气管：检开后，仔细检查其黏膜表面。

(2)肌胃：沿狭小部位剪开，倾去内容物，在生理盐水中剥离角质膜，检查两剥离面，然后将角质膜撕成小片，压片镜检。

(3)腺胃：在小方盘内剪开，倾去内容物，检查黏膜面，如有紫红色斑点和肿胀时，见剪下的内容物，经沉淀法处理后检查沉淀物。

(4)肠管：按十二指肠、小肠、盲肠和直肠几部分分别处理。肠管剪开后，将内容物和黏膜刮下物一起倾入烧杯中，加生理盐水后用沉淀法处理，最后检查沉淀物。对有结节病变的肠管，应刮取黏膜，压片镜检。

(5)法氏囊和输卵管：按肠管的方法检查。

(6)肝、肾、心、胰、肺：在盛生理盐水的盘中分别剪碎洗净，弃去大组织块，用沉淀法处理后，检查沉淀物。对有病变的部位，要压片进行镜检。

(7)鼻腔：剪开后观察表面，然后用水冲洗，检查沉淀物。

(8)眼：用镊子夹起眼睑，取下眼球，用水冲洗后检查沉淀物。

4.对体内蠕虫的检查

收集全部虫体，对肉眼容易鉴定的虫体立即鉴定并做好记录，对肉眼不易鉴定的虫体采用下列方法处理和鉴定，吸虫、绦虫用70%保存，盐酸卡红染色，二甲苯透明后制片鉴定;线虫用70%酒精保存，甘油透明后逐条鉴定;在统计感染率和感染强度的基础上，确定优势虫种。

5.对蜘蛛昆虫等体外寄生虫的检查

通过现场临诊观察，对螨虫发现病变后直接刮取病料，在实验室用消化法处理后，直接在显微镜下检查，确定其种类;对虱子等昆虫，根据症状确定其感染率，并直接取出虫体，在实验室电解剖显微镜和普通显微镜下鉴定其种类。根据感染率情况确定其优势虫种。

6.对球虫的检查

(1)粪样的采集与检查

从每个调查点随机采集鸡的新鲜粪便，分别置于干净的小塑料袋中，编号并记下鸡的日龄、粪便外观等。将粪样带回实验室，保存于4℃冰箱中待检。从每个粪样中称取2g，分别置于干净的小烧杯中，向其中加入20 ml饱和盐水，搅拌均匀后，经60目铜丝筛过滤，再将滤液倒入三角烧瓶中，使液面略高出瓶口，盖上盖玻片，静置40分钟后，将盖玻片以湿面覆于载玻片上，镜检。

(2)卵囊的分离与培养

将阳性粪样分别置于干净的小烧杯中，再加入适量的2.5%重铬酸钾溶液，盖上平皿，置于25℃的恒温箱培养7天后，取培养物分别经60目铜丝筛和260目尼龙筛过滤，倒去粪渣，将滤液置于离心管内，以2000r/min的速度离心10分钟，弃去上清液，在沉淀物中加入饱和盐水搅拌均匀，再置于离心机内离心(转速和时间同上)，取出，用直径为0.8cm的铁丝圈蘸取表层液膜，置于载玻片上，盖上盖玻片，镜检。再吸取上层液体，反复水洗沉淀，收集卵囊。

(3)球虫种类鉴定

观察卵囊和孢子化卵囊的形状、颜色，测量卵囊的大小。根据卵囊和孢子化卵囊的形态、大小，参照图谱和有关文献资料进行虫种鉴定。并统计其感染率。

(4)饱和盐水配制

把食盐加入沸水锅内，直到食盐不再溶解而出现沉淀为止(1000ml沸水中加入约400g食盐)。精制盐配制的饱和盐水一般不必过滤，待冷却后即可使用(冷却后的溶液有食盐结晶析出，即为饱和);粗制盐配制的饱和液可用滤纸、纱布或棉花过滤后备用。

7.对白细胞原虫的检查

首先通过临床症状观察和病理剖检变化确定疑似病鸡，然后用消毒过的针头自翼下静脉采取血液。涂片、姬氏染色，在油镜下发现虫体后确诊。

8.对组织滴虫的检查

首先通过临床症状和特征性病理变化确定疑似病鸡，采取疑似病鸡新鲜盲肠内容物，以加温(40℃)生理盐水稀释后作成悬滴标本镜检，发现虫体后确诊。

三、研究结果

(一)商品蛋鸡寄生虫流行区系研究结果

1.此次调查共发现辽宁省商品蛋鸡体内外寄生虫15种，分别隶属于5纲9科9属，虫体名称、感染情况及地理分布情况等详见表5。

表5 辽宁省规模化商品蛋鸡寄生虫流行区系调查研究结果