一、训练目标
学会保存、运送和用前检查兽医生物制品的方法;掌握兽医生物制品免疫接种的方法和步骤。
二、训练用设备和材料
疫苗、免疫血清、0.1%肾上腺素注射液、金属注射器(5 mL、10 mL、20 mL等规格)、玻璃注射器(1 mL、2 mL、5 mL等规格)、金属皮内注射器(螺口)、针头(兽用12～14号，人用6～9号，19～25号螺口皮内针头)、煮沸消毒锅、镊子、毛剪、脸盆、搪瓷盆、毛巾、纱布、脱脂棉、气雾免疫器、5%碘酒、70%酒精、来苏儿、新洁尔灭等消毒剂、体温计、出诊箱、工作服、登记册、卡片、保定家畜用具、实验动物。
三、训练内容与方法
(一)兽医生物制品的使用
1.免疫接种前的准备
制订免疫接种计划，确定接种日期，准备足够的生物制剂、器材、药品、免疫登记表，安排及组织接种和保定人员，按照免疫程序有计划地进行免疫接种。免疫接种前，必须对所使用的生物制剂进行仔细检查，不符合要求的一律不得使用，对预防接种动物进行临诊观察，必要时进行体温检查，凡体质瘦弱、妊娠后期、体温升高者或疑似患病动物均不应接种疫苗，过后及时补种。所用器械高压灭菌20～30 min或煮沸消毒30 min，冷却后用无菌纱布包裹备用。疫苗的稀释液、稀释倍数和稀释方法必须严格按照使用说明书进行，稀释疫苗过程中严格遵照无菌操作原则进行。
2.免疫接种用生物制品的保存、运送和用前检查
(1)保存。各种生物制品应保存在低温、阴暗及干燥的场所，灭活菌苗、致弱菌苗、类毒素、免疫血清等应保存在2～15 ℃防止冻结;致弱的病毒疫苗，如猪瘟兔化弱毒疫苗、鸡新城疫弱毒疫苗等，应置放在0 ℃以下冻结保存。
(2)运送。要求包装完善，防止碰坏瓶子和散播活的弱毒病原体。运送途中避免日光直射和高温，并尽快送到保存地点或预防接种的场所。弱毒疫苗应放在装有冰块的广口瓶内运送，以免其性能降低或丧失。
(3)用前检查。各种兽医生物制品在使用前，均需详细检查，如没有瓶签或瓶签模糊不清，没有经过合格检查的，过期失效的，生物制品的质量与说明书不符者，如色泽、沉淀有变化，制剂内有异物、发霉和有臭味的，瓶塞不紧或玻璃破裂的，没有按规定方法保存的，一律不得使用。经过检查，不能使用的生物制品应立即废弃，不能与可用的生物制品混放在一起，决定废弃的弱毒生物制品应煮沸消毒或予以深埋。
(二)免疫接种的方法
1.注射免疫法
注射免疫法可分为皮下接种、皮内接种、肌肉接种等。
(1)皮下接种法。对马、牛等大家畜皮下接种时，一律采用颈侧部位，猪在耳根后方，家禽在胸部、大腿内侧。家畜一般用16～20号针头，家禽则用小于20号的针头。皮下接种的优点是操作简单，吸收较皮内接种为快。缺点是使用剂量多，而且同一疫苗，应用皮下接种时，其反应较皮内为大。大部分常用的疫苗和免疫血清，一般均采用皮下接种。
(2)皮内接种法。马的皮内接种采用颈侧、眼睑部位，牛、羊除颈侧外，可在尾根或肩胛中央部位，猪大多在耳根后，鸡在肉髯部位。现用兽医生物制品用作皮内接种的，仅有羊痘弱毒疫苗等少数制品，其他均属于诊断液方面。一般使用专供皮内注射的注射器(容量2～10 mL)，0.6～1.2 cm长的螺旋针头(针孔直径19～25号)，也可使用蓝心注射器(容量1 mL)和相应的注射针头。皮内接种的优点是使用药液少，同样的疫苗皮内注射较皮下注射反应小。同时，真皮层的组织比较致密，神经末梢分布广泛，特别是猪的耳根皮内比其他部位容易保持清洁。同量药液皮内注射时所产生的免疫力较皮下注射高。
(3)肌肉接种法。马、牛、猪、羊的肌肉接种，一律采用臀部和颈部两个部位，鸡可在胸肌部接种。一般使用16～20号针头，长2.5～3.7 cm。肌肉接种的优点是药液吸收快，注射方法也较简便。缺点是在一个部位不能大量注射，如接种部位不当，易引起跛行。
(4)静脉接种法。马、牛、羊的静脉接种，一律在颈静脉部位，猪在耳静脉部位，鸡则在翼下静脉部位。免疫血清可采用静脉接种，疫苗、诊断液一般不作静脉注射。马、牛、羊的静脉接种部位在左右颈侧均可，一般使用14～20号针头。猪的静脉接种在耳朵正面下翼的两侧，一般使用19～23号针头，长2.5～5 cm。静脉接种的优点是可大剂量使用，奏效快，可以及时抢救病畜。缺点是手续比较麻烦，如设备与技术不完备时，难以进行。此外，如所应用的血清为异种动物者，可能引起过敏反应(血清病)。
2.经口免疫法
(1)饮水免疫。将可供口服的疫苗混于水中，畜禽通过饮水而获得免疫。
(2)喂食免疫。将可供口服的疫苗用清水稀释后拌入饲料，动物通过进食而获得免疫。经口免疫时，应按动物头数和每头动物平均饮水量或进食量，准确计算需用的疫苗剂量。免疫前，一般应停饮或停喂半天，以保证饮喂疫苗时，每头动物都能饮用一定量的水或吃入一定量的料。应当用冷的清水稀释疫苗，混有疫苗的饮水和饲料也要注意掌握温度，一般以不超过室温为宜。已经稀释的疫苗，应迅速饮喂。疫苗从混合在水或料内到进入动物体内的时间越短，效果越好。如猪肺疫弱毒疫苗和鸡新城疫弱毒疫苗常采用这种方法免疫。本法具有省时、省力的优点，适于大群动物的免疫，缺点是由于动物的饮水量或进食量有多有少，因而进入每头动物体内的疫苗数量，不能像其他方法那样准确一致。
3.滴鼻、点眼法
此法常用于禽类弱毒苗(如新城疫Ⅱ、Ⅳ系或法氏囊等)的免疫。方法是按瓶签注明头(羽)份，用稀释液稀释后，垂直滴入一侧眼睛或鼻孔里，等疫苗扩散到整个角膜或被吸入鼻孔后才可放鸡，否则滴入的疫苗易被甩丢，影响免疫效果。若疫苗停在鼻孔处，可按压对侧鼻孔，让其吸进。在接种过程中，严禁攀比速度、马虎了事。另外，滴鼻免疫也可用于猪的免疫，如猪伪狂犬病疫苗的免疫接种。
4.气雾免疫法
此法是用压缩空气通过气雾发生器，将稀释疫苗喷射出去，使疫苗形成直径1～10 μm的雾化粒子，均匀地浮游在空气中，通过呼吸道吸入肺内，以达到免疫目的。气雾免疫的装置由气雾发生器(即喷头)及动力机械组成。压缩空气的动力机械，可因地制宜，利用各种气泵或用电动机、柴油机带动空气压缩泵。无论以何种方法做动力，都要保持每平方厘米有2 kg以上的压力，才能达到疫苗雾化的目的。雾化粒子大小与免疫效果有很大关系。一般粒子大小在1～10 μm为有效粒子。气雾发生器的有效粒子在70%以上者为合格。测定雾化粒子大小时，用一拭好的盖玻片，周围涂以凡士林油，在盖玻片中央滴一小滴机油，用拇指和食指转盖玻片，机油液面朝喷头，在距离喷头10～30 cm处迅速通过，使雾化粒子吹于机油面上，然后将盖玻片液面朝下放于凹玻片上，在显微镜下观察，移动视野，用目测微尺测量其大小(方法与测量细菌大小相同)，并计算其有效粒子率。每次制成的气雾发生器或新使用的气雾发生器，都须进行粒子大小的测定，合格后方可使用。
(1)室内气雾免疫法。此法需有一定的房舍设备。免疫时，疫苗用量主要根据房舍的大小而定，可按下式计算：
疫苗用量=D×A/T×V
式中 D——计划免疫剂量;
A——免疫室容积(L);
T——免疫时间(min);
V——呼吸常数，即动物每分钟吸入的空气量(L)。
疫苗用量计算好以后，即可将动物赶入室内，关闭门窗。操作者将喷头由门窗缝伸入室内，使喷头保持与动物头部同高，向室内四面均匀喷射。喷射完毕后，让动物在室内停留20～30 min。操作人员要注意防护，戴上大而厚的口罩，如出现症状，应及时就医。
(2)野外气雾免疫法。疫苗用量主要以动物数量而定。以羊为例，如为1 000只，每只羊免疫剂量为50亿活菌，则需50 000亿活菌，如果每瓶疫苗含活菌4 000亿，则需12.5瓶，用500 mL灭菌生理盐水稀释。实际应用时，往往要比计算用量略高一些。免疫时，如每群动物的数目较少，可合群，将动物赶入四周有矮墙的圈内。操作人员手持喷头，站在畜群中，喷头与动物头部同高，朝动物头部方向喷射。操作人员要随时走动，使每一动物都有吸入机会。如遇微风，操作者应站在上风头。喷射完毕，让动物在圈内停留数分钟即可放出。进行野外气雾免疫时，注意个人防护，应穿工作衣裤和胶靴，戴大而厚的口罩，如出现症状，应及时就医。
(三)免疫接种注意事项
(1)工作人员需穿着工作服及胶鞋，必要时戴口罩。事先须修短指甲，并经常保持手指清洁。手用消毒液消毒后方可接触接种器械。工作前后应洗手消毒，工作中不应吸烟和进食。
(2)注意更换针头，以防交叉感染，人为散毒。注射器、针头、镊子等，用后浸泡于消毒溶液内，时间至少1 h，洗净擦干用白布分别包好保存。注射针筒排气溢出的药液，应吸积于酒精棉花上，并将其收集于专用瓶内，用过的酒精、碘酒棉花和吸入注射器内未用完的药液也注入专用瓶内，集中后销毁。
(3)在免疫接种前后10 d内，尽量不要使用抗菌素类药物，以免影响菌苗免疫效果。
自测训练
一、知识训练
1.简述预防接种、紧急接种、免疫程序的概念和意义。
2.分析免疫失败的原因有哪些?
3.制订免疫程序时应注意哪些问题?
二、技能训练
掌握兽医生物制品的使用和免疫接种方法。
动物医学
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